EXPRESSÃO DE GENES ENDÓGENOS POR RECOMBINAÇÃO NÃO HOMÓLOGA DE UMA CONSTRUÇÃO DE VETOR COM DNA CELULAR

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Abstract

"EXPRESSÃO DE GENES ENDÓGENOS POR RECOMBINAÇÃO NÃO HOMOLOGA DE UMA CONSTRUÇÃO DE VETOR COM DNA CELULAR". A presente invenção refere-se, de modo geral, a ativação da expressão de gene ou levando a expressão em excesso de um gene por processos de recombinação in situ. A invenção também refere-se, de modo geral, aos processos para expressão de um gene endógeno, em uma célula, em níveis mais altos do que aqueles normalmente encontrados na célula. Em uma concretização da invenção, a expressão de um gene endógeno é ativada ou aumentada seguindo-se integração na célula, por recombinação não homóloga ou ilegítima, de uma seqüência reguladora que ativa a expressão do gene. Em outra concretização, a expressão do gene endógeno pode ser adicionalmente aumentada por co-integração de um ou mais marcadores ampliáveis e seleção das cópias aumentadas de um ou mais marcadores ampliáveis localizados no vetor integrado. A invenção também provê processos para identificação e expressão dos genes que ainda não foram descobertos por processos atuais, uma vez que nenhuma seqüência alvo é necessária para integração. A invenção também provê processos para isolamento das moléculas de ácido nucléico (especificamente moléculas de CDNA) codificando proteínas de transmembrana e para isolamento das células expressando tais proteínas de transmembrana, que podem ser proteínas de transmembrana heterólogas. A invenção também refere-se aos genes isolados, produtos de gene, moléculas de ácido nucléico e composições compreendendo tais genes, produtos de gene e moléculas de ácido nucléico, que podem ser usados em várias aplicações terapêuticas e de diagnóstico. Assim, pela presente invenção, os genes endógenos incluindo aqueles associados com doença humana e desenvolvimento, podem ser ativados e isolados sem conhecimento precedente da seqüência, estrutura, função ou perfil de expressão dos genes.