PLASMÍDEO, REGIÃO DE CONTROLE DE REPLICAÇÃO SENSÍVEL A TEMPERATURA, E, PROCESSO PARA CRIAR UMA BACTÉRIA CORINEFORME

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Abstract

"PLASMÍDEO, REGIÃO DE CONTROLE DE REPLICAÇÃO SENSÍVEL A TEMPERATURA, E, PROCESSO PARA CRIAR UMA BACTÉRIA CORINEFORME". Uma bactéria corineforme em que um fragmento de DNA é incorporado em seu cromossomo é preparada por (a) obter um plasmídeo recombinante através de ligação de um fragmento de DNA tendo uma seqüência homóloga a um gene presente no cromossomo de uma bactéria corineforme para um plasmídeo que tem um segmento de região de controle de replicação de tipo selvagem de uma seqüência de nucleotídeo particular incluindo uma mutação e é replicável de modo autônomo em uma célula de bactéria corineforme a uma temperatua de cultura maior do que 31°C mas não replicável de modo autônomo na célula a uma temperatura de 31°C ou maior, (b) introduzir o plasmídeo recombinante na célula de bactéria corineforme, (c) cultivar a bactéria a uma temperatura de 31°C ou maior, (d) provocar a recombinação homóloga entre o fragmento de DNA e o gene presente no cromossomo da bactéria corineforme e tendo uma seqüência homóloga ao fragmento de DNA, e (e) selecionar uma bactéria corineforme em que o fragmento de DNA é incorporado em seu cromossomo. De acordo com a presente invenção, provê-se um processo para modificar de modo eficiente os traços genéticos de um hospedeiro em um curto período de tempo por obtenção de um plasmídeo sensível a temperatura a partir de um plasmídeo não demonstrando homologia com plasmídeos sensíveis a temperatura já registrados ou não demonstrando incompatibilidade com os mesmos.