REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE MULTIPLEX QUE EVITA DÍMERO PARA AMPLIFICAÇÃO DE MÚLTIPLOS ALVOS

IPC Classification

Priority claims

Abstract

A presente divulgação relaciona-se com métodos de amplificação de ácidos nucleicos que evitam problemas associados à formação de dímer-primer. Os métodos atuais são referidos aqui como o dímero evitou a reação em cadeia multiplex do polimerase (represa-PCR). Os métodos divulgados nisto compreendem geralmente as etapas do reverso que transcreve pelo menos uma primeira vertente do DNA, por exemplo cDNA de uma amostra do RNA, onde cada primeira vertente do DNA incorpore um local comum reverso da ligação do primer; selecionando cada primeira vertente do DNA; sintetizando pelo menos uma segunda vertente do DNA de cada um do pelo menos uma primeira vertente do DNA, onde cada segunda vertente do DNA incorpora um local comum dianteiro da ligação da primer; selecionando cada segundo fio de cDNA; e amplificando os fios de DNA usando iniciadores comuns. Alternativamente, o método pode ser executado usando um modelo gDNA. Os métodos aqui descritos, devido à seleção de fios de DNA e remoção de primers não utilizados antes da amplificação, evitam a formação de dímer-primer e permitem maior sensibilidade e eficiência em comparação com os métodos convencionais de PCR multiplex.