"PROCESSO PARA REPRODUZIR IN VITRO A ATIVIDADE PROTEOLÍTICA DA PROTEASE NS3 DE HCV, COMPOSIÇÃO DE MATÉRIA, E USO DA MESMA"

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Abstract

Patente de Invenção "PROCESSO PARA REPRODUZIR IN VITRO A ATIVIDADE PROTEOLÍTICA DA PROTEASE NS3 DE HCV, COMPOSIÇÃO DE MATÉRIA, E USO DA MESMA". Este é um processo para reproduzir in vitro a atividade de protease de serina associada com a proteína NS3 de HCV, que compreende o uso de ambas as sequências contidas em NS3 e sequências contidas em NS4a. Este processo obtém vantagem da capacidade de proteína NS4A de HCV, ou sequências contidas na mesma, para atuar como um co-fator da atividade de protease de serina ou mais geralmente as atividades enzimática associadas com NS3. A atividade de protease de serina ótima é obtida quando NS4A está presente em umas relação molar de pelo menos 1:1 com NS3.NS3 e NS4A também podem ser incorporados na mistura de reação como precusor NS3-NS4A, como seu precursor irá gerar, por meio de um evento auto proteolític, quantidades equimolares de NS3 e NS4. Também é possível mudar o sítio de clivagem entre NS3 e NS4A em um precursor, de modo que NS4A permanece covalentemente ligado a NS3. As sequências que não influenciam a atividade proteolítica de NS3 podem subsequentemente ser removidas do referido precursor não protelisável. a invenção também refere-se a uma composição de matéria que compreende sequências contidas em NS3 e NS4A, e ao uso destas composições para estabelecer um teste enzimático capaz de seleção, para fins teraupêuticos, compostos que inibem a atividade enzimática associada com NS3. A figura mostra vetores de plasmídeos usados no processo para tivar protease NS3 de HCV em células cultivadas e in vitro.