ÁCIDO NUCLEICO VETORIAL, SEU MÉTODO DE PRODUÇÃO, BEM COMO MÉTODOS PARA SELECIONAR PELO MENOS UMA CÉLULA HOSPEDEIRA EUCARIÓTICA QUE EXPRESSA UM POLIPEPTÍDEO DE INTERESSE, E PARA PRODUZIR UM POLIPEPTÍDEO DE INTERESSE

IPC Classification

Priority claims

Abstract

EXPOSIÃÃO DA SUPERFÃCIE CELULAR DE ISOFORMAS DE POLIPEPTÃDEO MEDIANTE A INTERRUPÃÃO DA LEITURA COMPLETA DO CÃDON. A presente invenção inter alia refere-se a um método para a geração ou seleção de uma célula hospedeira eucariótica que expressa um nível desejado de um polipeptídeo de interesse, compreendendo: a) fornecer uma pluralidade de células hospedeiras eucarióticas compreendendo um ácido nucleico heterólogo que compreende pelo menos um cassete (Cas-POI) compreendendo pelo menos um primeiro polinucleotídeo (Pn-POI) que codifica o polipeptideo de interesse, pelo menos um códon de parada a jusante do primeiro polinucleotídeo, e um segundo polinucleotídeo a jusante do códon de parada que codifica uma âncora da transmembrana de imunoglobulina ou uma variante funcional desta; b) cultivar as células hospedeiras eucarióticas para permitir a expressão do polipeptídeo de interesse tal que pelo menos uma parte do polipeptídeo de interesse é expressa como um polipeptídeo de fusão que compreende a âncora da transmembrana de imunoglobulina ou uma variante funcional desta, em que dito polipeptídeo de fusão está sendo apresentado na superfície de dita célula hospedeira; c) selecionar pelo menos uma célula hospedeira eucariótica baseada na presença ou quantidade do polipeptídeo de fusão apresentado na superfície da célula. Também são fornecidas células hospedeiras compreendendo respectivamente ácidos nucleicos heterólogos designados e métodos para produzir um polipeptídeo usando as respectivas células hospedeiras.