CEPA H. POLYMORPHA, E PROCESSO PARA A FABRICAÇÃO DE ETANOL

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Abstract

CEPA FI. POLYMORPHA, PROCESSO PARA a FABRICAÃÃO DE E- TANOL E ÃCIDO NUCLÃICO RECOMBINANTE Os genes SWA2 e GAMI ãa Ievedura, Schwanniomyces occidentalis, que encoâifica (Alfa)-arnilase e glucoamilase, respectivamente, foram clonados e expressos na H. polymorpha. A expressão foi obtida pela integração dos genes SWA2 e GAMI no cromossomo de H. polymorpha sob Iigação de modo operável a um promotor constitutivamente forte do gene de H. polymorpha - gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (HpGAP). Os transformantes resultantes adquiriram a habilidade de serem cultívados em um meio mínimo que contém amido soIúvel como única fonte de carbono e pode produzir Etanol em fermentação de alta temperatura a partir do amido até 10 g/l. Um gene XYN2 que encodifica a endoxilanase foi obtido a partir do fungo Tríchoderma reseei, e um gene xlnD que codifica para a ss-xilosidase foi obtido a partir do fungo Aspergillus niger.; A co-expressão destes genes foi também atingida pela integração no cromossomo de H. poIy-morpha sob o controle do promotor HpGAP. Os transformantes resultantes puderarn crescer em um meio mínimo suplementado com xilana de madeira de vidoeiro como única fonte de carbono. A expressão satisfatória de enzimas xilanolíticas resultou em uma cepa receptora que propicia a fermentação de xilana de madeira de vidoeiro em etanol a 48°C. Além disso, com co-expressão dos genes precedentes em uma cepa de H. poIymorpha que expressam excessivamente um gene de piruvato descarboxilase melhorou ainda mais a produção de etanol.