PURIFICAÇÃO DE POLISSACARÍDEOS TIPO 3 DE STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE

IPC Classification

Priority claims

Abstract

MÃTODOS PARA A REDUÃÃO OU REMOÃÃO DE IMPUREZAS PROTÃICAS DE UM LISADO CELULAR DE STREPTOCOCCUS PNEUMONIAE COMPREENDENDO POLISSACARÃDEOS SOROTlPO 3A presente invenção refere-se a métodos aperfeiçoados para a redução ou remoção de impurezas protéicas de um complexo lisato ou centrado celular de Streptococcus pneumoniae que compreende polissacarídeos sorotipo 3, envolvendo etapas que referem-se a aquecimento pós-lise ou ajuste de pH. Em certos métodos, o lisado é aquecido por um tempo e a uma temperatura suficiente para desnaturar proteínas presentes no lisado e provocar sua agregação e precipitação. Em uma modalidade, o lisado é aquecido a pelo menos 60°C por pelo menos 30 minutos para causar agregação e precipitação de proteínas, mais particularmente cerca de 60°C a cerca de 70°C por cerca de 30 a cerca de 50 minutos, e ainda mais particularmente a cerca de 65°C por cerca de 40 minutos. Em outros métodos, o pH do lisado ou centrado é elevado para pelo menos 8,0 para aperfeiçoar capacidade de filtração, mais particularmente cerca de 8,0 a 8,4, e ainda mais particularmente cerca de 8,2. Em métodos adicionais, etapas de aquecimento e ajuste de pH são combinadas para provocar a agregação e precipitação de proteínas, bem como para aperfeiçoar capacidade de filtração dos lisados ou centrados. Em outros métodos, o pH do lisado ou centrado é baixado para cerca de 3,0 a cerca de 5,0 para causar agregação e precipitação de proteínas. Tais métodos permitem a produção de lisados ou centrados que contêm polissacarídeos sorotipo 3 substancialmente purificados.