PREPARAÇÃO DE BIBLIOTECA GENÔMICA E ENSAIOS EPIGENÉTICOS DIRECIONADOS COM O USO DE RIBONUCLEOPROTEÍNAS DE CAS-GRNA

IPC Classification

Priority claims

Abstract

PREPARAÇÃO DE BIBLIOTECA GENÔMICA E ENSAIOS EPIGENÉTICOS DIRECIONADOS COM O USO DE RIBONUCLEOPROTEÍNAS DE CAS-gRNA. A presente invenção fornece a preparação de biblioteca genômica com o uso de RNPs de Cas-gRNA e ensaios epigenéticos direcionados. Algumas composições incluem, de uma primeira espécie, substancialmente apenas os polinucleotídeos de fita simples; de uma segunda espécie, substancialmente apenas polinucleotídeos de fita dupla; e iniciadores de amplificação ligados às extremidades dos segundos polinucleotídeos de fita dupla e substancialmente não ligados a quaisquer extremidades dos primeiros polinucleotídeos de fita dupla. Algumas composições incluem uma primeira e uma segunda moléculas de um polinucleotídeo alvo que tem uma sequência, a primeira molécula tendo uma primeira extremidade em uma primeira subsequência, a segunda molécula tendo uma primeira extremidade em uma segunda subsequência, em que a primeira subsequência se sobrepõe apenas parcialmente à segunda subsequência. Alguns exemplos fornecem uma composição que inclui um polinucleotídeo alvo e uma primeira proteína de fusão incluindo uma RNP de Cas-gRNA acoplada a uma transposase que tem um adaptador de amplificação acoplado à mesma. A RNP de Cas-gRNA pode ser hibridizada com uma subsequência no polinucleotídeo alvo.