COMPLEXO DE NUCLEOPROTEÍNA, CÉLULA TRANSFORMADA, MÉTODO DE LIGAÇÃO, CLIVAGEM, MARCAÇÃO OU MODIFICAÇÃO DE UM POLINUCLEOTÍDEO ALVO DE FITA DUPLA EM UMA CÉLULA HUMANA E USO DE PELO MENOS UMA MOLÉCULA-GUIA DE RNA E UMA PROTEÍNA CAS

IPC Classification

Priority claims

Abstract

A presente invenção refere-se ao campo de engenharia genética e, mais particularmente, à edição de ácido nucleico e modificação do genoma. A presente invenção fornece uma proteína Cas isolada ou fragmento de polipeptídeo da mesma tendo uma sequência de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 ou uma sequência de pelo menos 77% de identidade com a mesma. A proteína Cas ou polipeptídeo é capaz de ligação, clivagem, marcação ou modificação de um polinucleotídeo alvo de fita dupla a uma temperatura na faixa de 20°C e 100°C, inclusive. A invenção fornece adicionalmente moléculas de ácido nucleico isoladas codificando referidas nucleases Cas9, vetores de expressão e células hospedeiras. A invenção também fornece sequências PAM reconhecidas pela proteína Cas ou polipeptídeo. As nucleases Cas9 descritas aqui fornecem novas ferramentas para engenharia genética em geral, em particular em temperaturas elevadas.