COMPOSIÇÃO CONTENDO ESFEROIDES, MÉTODO PARA SUA OBTENÇÃO E USO COMO MODELO EXPERIMENTAL

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Abstract

COMPOSIÇÃO CONTENDO ESFEROIDES, MÉTODO PARA SUA OBTENÇÃO E USO COMO MODELO EXPERIMENTAL. Método para produção de esferoides utilizáveis como modelos in vitro, para estudo de infecção viral causada pelo SARS-CoV-2 e identificação de alvos farmacológicos, com majoração de escala e empregabilidade em setores que demandem um volume maior de esferoides com alta reprodutibilidade. A invenção se refere ainda à composição de esferoides produzida pelo método, com aplicação como modelo experimental em ensaios in vitro para infecção viral pelo SARS-CoV-2 bem como em outros ensaios in vitro que necessitem de células epiteliais do aparelho respiratório, como em testes de medicamentos e antivirais para doenças do tecido pulmonar, ou para fins diagnósticos e testes de triagem de toxicidade. O método compreende o cocultivo de células epiteliais e estromais do aparelho respiratório, por meio da obtenção de um pellet a partir de células epiteliais e estromais misturadas em uma proporção determinada, pré-lavagem e centrifugação; adição de meio quimicamente definido para cultivo e suplementação correspondente; suplementação 3D compreendendo albumina humana; ácido ascórbico; Insulina-Transferrina-Selênio; e penicilina e estreptomicina; homogeneização e transferência da suspensão para placa ou micromolde com superfície não aderente; repouso; adição de meio para a formação dos esferoides; e manutenção em condições de cultivo.