CLONE DE HPIV RECOMBINANTE, PROCESSOS PARA PREPARAR VÍRUS PARAINFLUENZA HUMANO RECOMBINANTE E PARA INTRODUZIR UMA MUTAÇÃO ESPECÍFICA DE SÍTIO DENTRO DO GENOMA DE UM VÍRUS PARAINFLUENZA HUMANO, E, CÉLULA HOSPEDEIRA

Classificação IPC

Prioridades unionistas

Resumo técnico

''CLONE DE HPIV RECOMBINANTE, PROCESSOS PARA PREPARAR VÍRUS PARAINFLUENZA HUMANO RECOMBINANTE E PARA INTRODUZIR UMA MUTAÇÃO ESPECÍFICA DE SÍTIO DENTRO DO GENOMA DE UM VÍRUS PARAINFLUENZA HUMANO, E, CÉLULA HOSPEDEIRA''. É fornecido um sistema para gerar vírus parainfluenza humano recombinante, particularmente vírus parainfluenza humano, recombinante, infeccioso, tipo 3 (HPIV-3). Em uma versão, o sistema compreende um clone compreendendo uma seqüência de nucleotídeo que codifica um anti-genoma de comprimento total, de sentido positivo, do HPIV e pelo menos um clone de suporte compreendendo uma seqüência de nucleotídeo que codifica a proteína P do HPIV e a proteína L do HPIV. Em outra versão, o sistema compreende ainda um clone de suporte, que compreende uma seqüência de nucleotídeo que codifica a proteína NP do HPIV. A presente invenção também fornece um clone que compreende uma seqüência de nucleotídeo codificando o antigenoma de comprimento total, de sentido positivo do HPIV-3. O clone também compreende um promotor de polimerase do RNA, operativamente ligado à seqüência de codificação do antigenoma do HPIV-3. Em uma versão preferida, o clone compreende também um promotor da polimerase do RNA, operativamente ligado à seqüência codificadora do antigenoma do HPIV-3. Em uma versão preferida, o clone compreende ainda uma seqüência de nucleotídeo que codifica uma ribozima imediatamente a jusante da seqüência codificando o anti-genoma do HPIV-3. A presente invenção também refere-se a um processo de preparar vírus HPIV-3 recombinante, tendo mutações específicas de sítio no genoma HPIV-3. O processo compreende preparar um clone compreendendo uma seqüência codificando o antigenoma do HPIV-3 modificado; introduzir o clone do HPIV-3 modificado e suportar clones que compreendem seqüências de nucleotídeo codificando uma proteína P de HPIV-3, uma proteína L do HPIV-3 e, preferivelmente, uma proteína NP do HPIV-3 dentro das células hospedeiras; e cultivar as células hospedeiras sob condições que permitam a síntese do antigenoma do HPIV-3 modificado e das proteínas L, P e NP do HPIV-3.