ÁCIDO NUCLEICO, VETOR DE ÁCIDO NUCLEICO, PARTÍCULA DE ENTREGA, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, CÉLULA HOSPEDEIRA, MÉTODO PARA EDIÇÃO DO GENOMA E MÉTODO E KIT PARA PREVENÇÃO E/OU TRATAMENTO DE UMA DOENÇA

Classificação IPC

Prioridades unionistas

Resumo técnico

A presente invenção diz respeito à edição genômica por meio de nucleases Cas. Os inventores verificaram que a expressão de nucleases Cas pode ser finamente controlada pelo uso de elementos reguladores compreendendo um promotor mínimo e ao menos um ácido nucleico elemento de resposta a aminoácidos (AARE), que são responsivos a uma dieta deficiente em ao menos um aminoácido essencial, ou tunicamicina. Por exemplo, uma fusão da FLAG-Cas9-GFP e uma fusão da Cas9-FLAG-RFP poderia ser expressa em células 293 T. Além disso, na presença de um plasmídeo doador dotado de um gene resistente a puromicina, a integração do referido gene resistente a puromicina pode ser realizada no sítio do loco porto seguro AASV1 no genoma das células 293 T. Portanto, a invenção diz respeito a um ácido nucleico para a expressão controlada de um ácido nucleico que codifica uma nuclease Cas em um indivíduo, compreendendo (i) um polinucleotídeo regulador que compreende um promotor mínimo e de um a vinte ácidos nucleicos AARE, e (ii) um ácido nucleico que codifica uma nuclease Cas, que é colocada sob o controle do referido polinucleotídeo regulador.