MÉTODOS DE AMPLIFICAÇÃO E SEQÜENCIAMENTO DE ÁCIDO NUCLÉICO

IPC Classification

Priority claims

Abstract

Patente de Invenção: "MÉTODOS DE AMPLIFICAÇÃO E SEQÜENCIAMENTO DE ÁCIDO NUCLÉICO" . Métodos para amplificação e sequenciamento de pelo menos um ácido nucléico compreendendo as seguintes etapas: (1) formar pelo menos um padrão de ácido nucléico compreendendo o(s) ácido(s) nucléico(s) a serem amplificados, onde o(s) referido(s) ácido(s) nucléico(s) contêm na extremidade 5' uma seqüência Y de oligonucleotídeo e na extremidade 3' uma seqüência Z de oligonucleotídeo e, além disso, o(s) ácidos nucléicos transportam na extremidade 5' um recurso para ligar o(s) ácido(s) nucléico(s) a um susporte sólido; (2) misturar os referidos padrões de ácido nucléico com um ou mais iniciadores X de colônia, que podem hibridizar para a seqüência Z de oligonucleotídeo e transportam na extremidade 5' um recurso para ligação dos iniciadores de colônia a um suporte sólido, na presença de um suporte sólido a fim de que as extremidades 5' de igualmente o padrão de ácido nucléico e os iniciadores de colônia liguem-se ao suporte sólido; (3) realizar uma ou mais reações de amplificação de ácido nucléico nos padrões de ligação, a fim de que as colônias de ácido nucléico sejam geradas e, opcionalmente, realizar pelo menos uma etapa de determinação de seqüência de uma ou mais colônias de ácido nucléico geradas. Suportes sólidos, kits e mecanismo para uso nestes métodos.