OTIMIZAÇÃO DE CÉLULAS PARA A ATIVAÇÃO ENDÓGENA DE GENS.

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Abstract

Patente de Invenção: "OTIMIZAÇÃO DE CÉLULAS PARA A ATIVAÇÃO ENDÓGENA DE GENS" . A invenção refere-se a um processo para otimização da expressão genética em células. Um primeiro aspecto refere-se a um processo para modificação da expressão de um gene alvo presente endogenamente em uma célula eucariôntica através de introdução de uma seqüência de controle de expressão heteróloga no genoma da célula por meio de recombinação homóloga, assim como o corte transmitido por uma recombinase de local específico do DNA estranho inserido e sua substituição por outras seqüências de controle de expressão heterólogas e/ou gens de amplificação. Além disso, a invenção refere-se à introdução de uma ou mais seqüências de ácido nucléico, na qual uma proteína ativadora ou um complexo de proteína ativadora, por exemplo, encontra um fator induzível de hipoxia (HIF), no genoma de uma célula eucariôntica por recombinação homóloga, para modificar a expressão de um gene alvo. Além disso, a invenção refere-se a um processo para testar a influência dos fragmentos de ácido nucléico não codificadores de lado 5' ou 3' na expressão de um gene alvo por determinação de um gene repórter. Além disso, a invenção refere-se a um processo para preparação de células eucariônticas DHFR negativas contendo uma seqüência alvo-recombinase assim como a expressão de uma seqüência de ácido nucléico inserida na seqüência alvo de recombinase.