VARIANTE DE CELULASE TENDO UMA RESISTÊNCIA AUMENTADA A TENSÍDEO DE ÂNION.

IPC Classification

Priority claims

Abstract

"VARIANTES DE ENZIMA, DE CELULASE E DE EGV DE HUMICOLA INSOLENS E PROCESSOS DE REDUÇÃO DA TERMOESTABILIDADE DE UMA CELULASE, DE FORNECIMENTO DAS PROPRIEDADES DE UMA ENZIMA, DE MELHORIA DA ATIVIDADE ESPECÍFICA DE UMA CELULASE, DE ALTERAÇÃO DO PERFIL DE ATIVIDADE DO pH, DO ÓTIMO DA ATIVIDADE DO pH, DO PERFIL DA ESTABILIDADE DO pH, OU DO ÓTIMO DA ESTABILIDADE DO pH DE UMA CELULASE E DE ALTERAÇÃO DA ESTABILIDADE DE UMA CELULASE" . Um processo para melhorar as propriedades de uma enzima celulolítica por substituição de aminoácidos, deleção ou inserção, o processo compreendendo as etapas de: a) construir um alinhamento múltiplo de pelo menos duas seqüências de aminoácidos conhecidas como tendo estruturas tridimensionais similares à endogluconase V (EGV) do Humicola insolens conhecido do registro 4ENG do Protein Data Bank (Banco de Dados de Proteínas); b) construir uma estrutura tridimensional produzida por homologia da enzima celulolítica, com base na estrutura da EGV; c) identificar as posições dos resíduos de aminoácidos presentes em uma distância da fenda de ligação do substrato de não mais do que 5 Å; d) identificar os resíduos do aminoácido superficialmente expostos da enzima; e) identificar todas as posições residuais dos aminoácidos carregados ou potencialmente carregados da enzima; f) escolher uma ou mais posições, em que o resíduo dos aminoácidos deva ser substituído, deletado ou onde uma inserção deva ser provida; g) realizar a substituição, deleção ou inserção, mediante o uso de técnicas de engenharia proteínica convencional; e variantes de celulase obtidas pelo processo.