PROCESSO PARA DETEÇÃO DE MUTAÇÕES INDUZIDAS POR DROGA NO GENE DE TRANSCRIÇÃO REVERSA

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Abstract

Patente de Invenção: "PROCESSO PARA DETEÇÃO DE MUTAÇÕES INDUZIDAS POR DROGA NO GENE DE TRANSCRIÇÃO REVERSA". A presente invenção refere-se a um processo para a deteção rápida e confiável de mutações induzidas por droga no gene transcriptase reversa permitindo a simultânea caracterização de uma faixa de códons envolvidos em resistência a droga usando conjuntos específicos de sondas otimizadas para funcionarem juntas em um ensaio de hibridização reversa. Mais particularmente, a presente invenção refere-se a um processo para determinação de suscetibilidade a drogas antivirais de linhagens de HIV presentes em uma amostra biológica, compreendendo: (i) se necessário for, liberação, isolamento ou concentração de ácidos polinucleicos presentes na amostra; (ii) se necessário, amplificação de parte relevante dos genes transcriptase reversa presentes na dita amostra com pelo menos um par de primers apropriado; (iii) hibridização dos ácidos polinucleicos da etapa (i) ou (ii) com pelo menos duas sondas de gene RT hibridizando especificamente para uma ou mais sequências alvos com as ditas sondas sendo aplicadas a localizações conhecidas sobre um suporte sólido e com as ditas sondas sendo capazes de hibridizarem simultaneamente a suas respectivas regiões alvos sob condições apropriadas de hibridização e lavagem permitindo a deteção de alvos homólogos, ou as ditas sondas hibridizando especificamente com uma sequência complementar a qualquer uma das ditas sequências alvos, ou uma sequência onde T está substituída por U; (iv) deteção de híbridos formados na etapa (iii); (v) inferir a sequência de nucleotídios nos códons de interesse e/ou os aminoácidos dos códons de interesse e/ou espectro de resistência de droga antiviral, e possivelmente o tipo de isolatos de HIV envolvidos a partir do sinal(ais) de hibridização diferencial obtido na etapa (iv).