APARELHO DE FOCALIZAÇÃO ISOELÉTRICA EM CAPILAR COM PH CONTROLADO POR LUZ LASER ACOPLADA

IPC Classification

Abstract

Patente de Invenção "Aparelho de Focalização Isoelétrica em Capilar com pH Controlado por Luz LASER acoplada". A presente invenção, que em apenas um equipamento, conjuga as funções de um Aparelho de Focalização Isoelétrica em Capilar Convencional adicionado à vantagem operacional que se tem de poder, com a luz LASER acoplada, controlar pH ao longo do capilar de uma maneira eficiente, econômica, automatizada e muito rápida. O dito aparelho é constituido de um capilar dielétrico (1) com as extremidades abertas e imersas nos reservatórios (2) e (3), o que permite a entrada e saída da solução tampão. A amostra é injetada em uma das extremidades e uma diferença de potencial elétrico (V) é aplicada entre os reservatórios pela fonte de alta tensão (10). Ao mesmo tempo a luz do LASER (5) é acoplada ao núcleo do capilar que é preenchido com uma solução tampão com índice de refração maior que o material dielétrico de que é feito a parede do capilar. A solução tampão também contém um ou mais ácidos e/ou bases de Lewis fotosensíveis, isto é, os pK~a~ das moléculas excitadas é diferente do pK~a~ das moléculas no estado fundamental. Portanto o pH em uma certa posição dependerá da intensidade da luz nesto ponto, pois a taxa da transferência protonica intermolecular em um pequeno volume do líquido dependerá da intensidade da radiação neste ponto. Isto resulta num perfil variável de pH ao longo do capilar, este perfil sendo de uma variação espacial tanto mais rápido quanto mais brusca for a atenuação da intensidade da luz do LASER causada pela absorção e/ou espalhamento da mesma pelo meio. O pI de aminoácidos peptídeos, proteinas, enzimas e demais moléculas de interesse biológico pode ser determinado com alta precisão usando-se padrões de referência com os seus respectivos pI conhecidos, pois o detector de imagem espacial (8) fornecerá as posições relativas das zonas dos componentes.