PROCESSO PARA DETECTAR AMPLIAÇÃO DE UMA SEQUÊNCIA ALVO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS BI-HELICOIDAIS EM UMA REAÇÃO DE AMPLIAÇÃO POR DESLOCAMENTO DA CADEIA HELICOIDAL (SDA)

IPC Classification

Priority claims

Abstract

Trata-se de processos de polarização de fluorescência para a detecção de ampliação de ácidos nucléicos. Uma sonda de oligodesoxinucleotídeo marcada com fluorescência é convertida da forma mono- para a bi-helicoidal, de uma maneira dependente de alvo, durante a ampliação da seqúência alvo. Esta mudança de conformação é acompanhada por um aumento nos valores da polarização de fluorescência. O aumento na polarização de fluorescência pode ser medido em um fluorímetro em estado transiente, no tempo real, durante a reação de ampliação, sem qualquer manipulação física da amostra. Os processos da invenção, portanto, propiciam um sistema fechado, homogêneo, para as seqúência alvo e de ampliação e para a detecção da ampliação. Alternativamente, a ampliação pode ser detectada em um fluorímetro, após o final da reação de ampliação.