MÉTODO PARA IDENTIFICAR UM TEOR DE CARNE DE PORCO EM UM ALIMENTO.

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Abstract

MÃTODO PARA IDENTIFICAR UM TEOR DE CARNE DE PORCO EM UM ALIMENTO. Neste estudo, o ensaio da PCR em tempo real específico para a carne de porco é desenvolvido para a autenticação Halal. Três espécies de amostras de came são utilizadas, que foram de porco, bovino e galinha. Estes três tipos de came de aves domésticas estão entre as carnes mais habitualmente consumidas na Malásia e são facilmente disponíveis no mercado. O DNA de cada amostra de carne bruta foi extraído com êxito usando o Kit DNeasy (Marca Registrada) Blood & Tissue (Qiagen, Hilden, Alemanha). A concentração do DNA extraído é estimada pela espectrometria de absorção de UV usando o Biofotômetro (Eppendorf AG, Haznburg, Alemanha) antes da reação da PCR em tempo real. A temperatura de recozimento para os iniciadores está a 58ºC. Para verificar a especificidade dos iniciadores planejados, a reação é realizada para testar os iniciadores contra as outras duas amostras de carne para detectar possíveis reações cruzadas. A reação apenas amplificou o DNA de carne de porco em Ct (mais ou menos) 22,83. O ensaio de PCR em tempo real descrito neste documento demonstrou ser muito sensível com um limite de detecção baixo quando amostras foram testadas. O ensaio é feito preparando-se uma série de diluição de 10 vezes partindo de 100 ng de DNA foram usados para determinar a sensibilidade da reação. O limiar de sensibilidade foi até 0,001 ng de DNA de carne de porco. Foi relatado que um limite de detecção de 0,1 ng de DNA de carne de porco usando a PCR convencional. Neste contexto, o método seria útil na detecção de DNA de porcino em produtos alimentícios.