MÉTODO MULTIPARÂMETRO DE ALTA SENSIBILIDADE PARA ANÁLISE DE EVENTO RARO EM UMA AMOSTRA BIOLÓGICA

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Abstract

MÉTODO MULTIPARÂMETRO DE ALTA SENSIBILIDADE PARA ANÁLISE DE EVENTO RARO EM UMA AMOSTRA BIOLÓGICA Uma amostra de sangue contendo CTCs, ou outras células de interesse, é marcada com marcadores fluorescentes para análise de imagem e rastreada para identificar a presença e posição dentro do cartucho das cé- lulas-alvo ou elementos subcelulares. Uma amostra contendo células-alvo ou elementos subcelulares desejados é então ainda processada, em parte por fotodescoramento da amostra, para que aqueles mesmos alvos possam ser reanalisados com biomarcadores adicionais conjugados aos mesmos ou diferentes fluorocromos usando os mesmos critérios de geração de imagem que foram usados para a análise inicial. A presente invenção tem aplicações com alvos tais como células epiteliais circulantes, células, células tumorais circulantes, células endoteliais circulantes, leucócitos, subconjuntos de linfó- citos, células contendo uma organela ou receptor de interesse, resíduos ce- lulares, células rompidas e seus resíduos, ou qualquer outro elemento for- mado que poderia ser capturado e gerar imagem. A invenção fornece um meio adicional de interrogar alvos individuais de interesse, especialmente quando pareado com análise genética, tal como FISH.