MÉTODO DE PRODUÇÃO DE PLANTAS TRANSGÊNICAS QUE EXPRESSAM A ENZIMA SACAROSE SINTASE

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Abstract

MÉTODO DE PRODUÇÃO DE SINTASE DE SACAROSE RECOMBINANTE, USO DO MESMO NA FABRICAÇÃO DE KITS PARA A DETERMINAÇÃO DE SACAROSE, PRODUÇÃO DE GLICOSE DE ADP E PRODUÇÃO DE PLANTAS TRANSGÊNCIAS CUJAS FOLHAS E ÓRGÃOS DE ARMAZENAGEM ACUMULAM ALTOS TEORES DE GLICOSE DE ADP E AMIDO. A presente invenção refere-se a um médoto de produção de sintase de sacarose recombinante, ou seu uso na fabricação de kits para a determinação de sacarose, produção de ADPglicose e produção de plantas transgênicas cujas folhas e órgãos de armazenagem acumulam altos tores de ADPglicose e amido. Um método é descrito para a prodção eficiente de grandes quantidades de SS recombinante solúvel em forma ativa, por expressão do gene gene que codifica SS em uma cepa de Escherichia coli. O vetor de expressão usado significa que o SS recombinante produzido possui uma extremidade de histídina que facilita sua rápida purificação. Além disso, ele descreve seqüencias de versões mutadas do gene de SS que codifica isoformas de SS adequadas para a produção de ADPG. Fazendo uso das versões de "tipo selvagem" e "mutadas" de SS recombinante, um método eficiente é descrito para a produção de ADPG e UDPG. Ele também descreve o uso de SS para a produção de kits de ensaio para a determinação de sacarose. Finalmente, ele descreve a produção a produção de plantas transgênicas que ultra-expressam o gene gene de SS, ou constitutivamente ou em folhas ou órgãos de armazenagem, e que têm um alto teor (tanto em folhas quanto em tecidos de armazenagem) de sacarose, ADPG, G6P e amido como um resultado da atividade de sintetização de ADPG de SS.