MÉTODO DE IMOBILIZAÇÃO DE ENZIMA EM SUPORTE INERTE E COMPLEXO RESINA-ENZIMA ASSIM OBTIDO

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Abstract

"MÉTODO DE IMOBOLIZAÇÃO DE ENZIMA EM SUPORTE INERTE E COMPLEXO RESINA/ENZIMA ASSIM OBTIDO". O presente invento refere-se a um método para a imobilização de carboidrases, e mais especificamente a um método para a imobilização de carboidrases em resinas do tipo poliestireno divinilbenzênicas por troca iônica. A técnica de imobilização deste invento consiste em ligar por meios químicos e/ou físicos a molécula de uma enzima a um suporte inerte com retenção da atividade catalítica, a qual pode ser usada repetida e continuamente. O método, ora proposto, compreende as seguintes etapas: a) suspensão da resina aniônica do tipo copolímero divinilbenzênico em água deionizada, em um pH ajustado na faixa entre 4,0-6,0, por aproximadamente 24 horas sob agitação de 50-300 rpm a uma temperatura entre 25 e 35 C; b) adição da carboidrase à suspensão, deixando-se a mistura sob agitação de 50-300 rpm por aproximadamente 4 horas à mesma temperatura; c) separação do complexo resinalcarboidrase por centrifugação 2000-3000g/15 minutos e determinação do índice de adsorção pela dosagem de proteína; d) armazenamento do complexo resina/carboidrase em câmara fria até o momento do uso; e) medida da atividade do complexo resinalcarboidrase através da determinação de açúcares redutores totais; e recuperação por centrifugação do complexo resinalcarboidrase após medida de açúcares redutores totais.