PRODUÇÃO CONSTITUIDA DE ALTO NÍVEL DE ANTÍGENO PROTETOR PARA ANTRAZ

IPC Classification

Priority claims

Abstract

PRODUÃÃO CONSTITUTIVA DE ALTO NÃVEL DE ANTÃGENO PROTETOR PARA ANTRAZ. A presente invenção refere-se a um processo para a preparação de proteína de antígeno protetor para antraz partindo de E. coli usando cultura alimentada em batelada. Este processo cria um sistema de expressão constitutivo para produção rápida, eficiente, eficaz em relação ao custo e de alto nível de PA de antraz partindo de E. coli. As etapas do processo envolvem, transformar as células DH5a de E. coli com o plasmídeo de expressão constitutivo recombinante que contém o gene PA para obter as células DH5a recombinantes e testar a expressão de PA por lise das ditas células seguida por desnaturação com eletroforese em gel e técnica de Western Blotting usando anticorpos PA. Isto é seguido por fermentação e colheita das células com alta densidade de célula. As ditas células são solubilizadas usando-se Uréia 6 - 8 Molar e separadas por centrifugação. O PA desnaturado por uréia é isolado do dito sobrenadante e purificado e depois disso eluído.