11 ALFA-HIDROXILASE E ÓXIDO REDUTASE DE ASPERGILLUS OCHRACEUS

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Abstract

"11 ALFA-HIDROXILASE E ÓXIDO REDUTASE DE ASPERGILLUS OCHRACEUS". A presente invenção refere-se a uma nova enzima semelhante P450 de citocromo (Aspergillus ochraceus) isolada de biblioteca de cDNA gerada do ARNm de esporos de Aspergillus ochraceus. Quando o cDNA codificando a 11 alfa hidroxilase foi co-expresso em células de inseto Spodoptera frugiperda (Sf-9) com o cDNA codificando óxido redutase humana como um doador de elétrons, ela catalisou com sucesso a conversão do substrato esteróide 4-androsteno-3,17-diona (AD) a 11 alfa hidróxi AD como determinado por análise HPLC. A invenção também refere-se a moléculas de ácido nucléico associadas com ou derivadas destes cDNA s incluindo complementos, homólogos, e seus fragmentos, e processos de uso destas moléculas de ácido nucléico, para gerar, por exemplo, polipeptídeos e seus fragmentos. A invenção também refere-se à formação de anticorpos que reconhecem a 11 alfa hidroxilase e óxido redutase de A. ochraceus e processos de uso destes anticorpos para detectar a presença destes polipeptídeos nativos e recombinantes dentro de células hospedeiras não-modificadas e transformadas, respectivamente. A invenção também prove processos de expressão de gene 11 alfa hidroxilase de Aspergillus separadamente, ou em combinação com óxido redutase humana ou de Aspergillus, em células hospedeiras heterólogas, para facilitar a bioconversão de substâncias esteróides a suas contrapartes 11 alfa hidróxi.