MÉTODO PARA PRODUZIR FCRN BIOTINILADO NO TERMINAL C

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Abstract

MÉTODO PARA PRODUZIR FCRN BIOTINILADO NO TERMINAL C.Neste documento é relatado um método para produzir FcRn biotinilado no terminal C compreendendo as etapas de cultivo de uma célula de mamífero compreendendo um ácido desoxirribonucleico que codifica FcRn e E.coli biotina-[acetil-CoA-carboxilase] ligase (BirA) em um meio contendo biotina, e recuperação de FcRn biotinilado no terminal C a partir da célula ou meio de cultivo, em que o ácido desoxirribonucleico que codifica FcRn e E.coli BirA está integrado de forma estável no genoma da célula de mamífero e compreende na direção 5' para 3' um primeiro cassete de expressão que codifica a proteína semelhante ao complexo principal de histocompatibilidade de classe I (a-FcRn) compreendendo um marcador HisAvi no terminal C, um segundo cassete de expressão que codifica ß2-microglobulina (ß2m), um terceiro cassete de expressão que codifica a proteína semelhante ao complexo principal de histocompatibilidade de classe I (a-FcRn) compreendendo um marcador HisAvi no terminal C, um quarto cassete de expressão que codifica ß2-microglobulina (ß2m) e um quinto cassete de expressão que codifica E.coli biotina-[acetil-CoA-carboxilase] ligase.