LEVEDURA TRANSFORMADA COM UM ÁCIDO NUCLEICO ISOLADO, E MÉTODO PARA PRODUZIR ETANOL

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Abstract

ÁCIDO NUCLEICO ISOLADO; LEVEDURA; MÉTODO PARA PRODUZIR ETANOL; CEPA DE H. POLYMORPHA; E MÉTODO PARA IDENTIFICAR UM GENE. Trata-se de métodos para identificar genes que conferem tolerância a etanol em leveduras, genes que conferem tolerância a etanol e cepas de mutante usadas para identificar tais genes. Um gene designado no presente documento como HpEtt1 foi isolado a partir da levedura Hansenula polymorpha. A expressão de HpEtt1 em uma cepa de mutante de H. polymorpha sensível a etanol designada como 7E complementou a sensibilidade a etanol do mutante. Quando cópias múltiplas da HpEtt1 foram integradas no genoma e superexpressas, a cepa transformada demonstrou resistência a etanol e resistência ao agente de desdobramento de proteína AZC aproximadamente 10 vezes maior. A expressão de HpEtt1 também elevou a tolerância a etanol em Saccharomyces cerevisiae. A HpEtt1 tem 39% de identidade de sequência com uma proteína anteriormente identificada a partir de S. cerevisiae denotada MPE1, porém, o gene MPE1 não confere resistência a etanol ao mutante 7E. Outro gene da levedura Pichia stipites foi identificado, o qual codifica uma proteína ortóloga que tem 37% de identidade para HpEtt1 designada no presente documento como PsETT1 e também confere resistência a etanol ao mutante 7E.