MÉTODOS PARA PRODUZIR UMA GLICOPROTEÍNA HETERÓLOGA E PARA PRODUZIR UMA COMPOSIÇÃO DE GLICOPROTEÍNA, CÉLULA HOSPEDEIRA, COMPOSIÇÃO DE GLICOPROTEÍNA, E, USO DA PICHIA PASTORIS RECOMBINANTE.

IPC Classification

Priority claims

Abstract

MÉTODOS PARA PRODUZIR UMA GLICOPROTEÍNA HETERÓLOGA E PARA PRODUZIR UMA COMPOSIÇÃO DE GLICOPROTEÍNA, CÉLULA HOSPEDEIRA, COMPOSIÇÃO DE GLICOPROTEÍNA, E, USO DA PICHIA PASTORIS RECOMBINANTE. É descrito um método para aumentar a ocupção de sítio de N-glicosilação de uma glicoproteína terapêutica produzida em células hospedeiras recombinantes modificadas como aqui descrito e geneticamente engenheiradas para expressar a glicoproteína comparada com a ocupação de sítio de N-glicosilação da glicoproteína terapêutica produzida em uma célula hospedeira recombinante não modificada como aqui. Em particular, o método fornece células hospedeiras recombinantes que superexpressam uma oligossacariltransferase de subunidade heteróloga, que em formas de realização particulares é capaz de suprimir funcionalmente o fenótipo letal de uma mutação de pelo menos uma proteína essencial do complexo de oligossacaril-transferase de levedura (OTase), por exemplo, a proteína STT3D de Leishmania major, na presença de expressão dos genes da célula hospedeira que codifica o complexo de OTase endógeno. O método é útil para produzir glicoproteínas terapêutiocas com ocupação de sítio de N-glicosilação aumenta tanto em células eucarióticas inferiores tais como levedura e fungos filamentosos quanto em células eucarióticas superiores tais como células de planta e inseto e células de mamífero.