MÉTODOS PARA PRODUZIR UMA GLICOPROTEÍNA RECOMBINANTE E UMA ERITROPOIETINA HUMANA MADURA, E, COMPOSIÇÃO

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Abstract

MÉTODOS PARA PRODUZIR UMA GLICOPROTEÍNA RECOMBINANTE E UMA ERITROPOIETINA HUMANA MADURA, E, COMPOSIÇÃO - Métodos para produzir proteínas e glicoproteínas em Pichia pastoris que carecem da atividade de ligação cruzada detectável aos anticorpos fabricados contra antígenos da célula hospedeira são descritos. Em particular, métodos são descritos em que cepas de Pichia pastoris recombinantes que não demosntram uma aticidade de - manosiltransferase 2 com respeito a um N-glicano ou O-glicano e não demosntram pelo menos uma atividade selecionada de uma atividade de -manosiltransferase 1, 3, e 4 para produzir proteínas recombinantes e glicoproteínas. Estas cepas de Pichia pastoris recombinantes podem produzir proteínas e glicoproteínas que carecem de resíduos de -manose resistentes à -manosidade detectáveis nelas e assim, carecem da atividade de ligação cruzada aos anticorpos contra antígenos da célula hospedeira. São descritos ainda métodos para produzir eritropoietina humana bi-sialilada em Pichia pastoris que carecem da atividade de ligação cruzada detectável aos anticorpos contra antígenos da célula hospedeira.