SISTEMA DE SOLUÇÕES DE EXTRAÇÃO E CONSERVAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS PARA DETECÇÃO DIRETA PELAS TÉCNICAS DE PCR E SUAS VARIAÇÕES

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Abstract

SISTEMA DE SOLUÇÕES DE EXTRAÇÃO E CONSERVAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS PARA DETECÇÃO DIRETA PELAS TÉCNICAS DE PCR E SUAS VARIAÇÕES. A presente invenção fornece uma composição química para lise, extração e preservação de ácidos nucléicos em temperatura ambiente e método de detecção direta por RT-PCR. A composição química de preservação é uma solução ácida contendo um detergente não iónico onde acontece a lise celular e a preservação dos ácidos nucléicos. Para neutralizar a solução de conservação, permitindo seu uso nas técnicas de PCR, o processo depende de uma a solução de neutralização que é alcalina e contem aditivos. A mistura em proporção ideal da composição de preservação com a composição de neutralização permite as condições necessárias para a realização da técnica de PCR, sem a etapa de extração e/ou precipitação e/ou purificação presente nos protocolos padrões. A presente invenção pode ser aplicada na detecção de ácidos nucleicos de vírus, fungos, bactérias, vegetais e animais, ou partes constituintes destes como, por exemplo, sangue, plasma, secreções, muco, tecido, células isoladas e/ou saliva, entre outros. Em amostras de origem biológica, ambiental ou construções sintéticas, para fins de pesquisa, diagnóstico ou de interesse comercial. Ao mesmo tempo, a solução ácida da presente invenção pode ser aplicada como tampão (buffer) de eluição em protocolos de purificação de ácidos nucleicos ou na preservação de amostras de ácidos nucleicos para posterior purificação por métodos comerciais como cromatografia em coluna, beads magnéticas, sistemas líquidos que utilizam fenol e/ou clorofórmio, precipitação com álcool, entre outros.