ENSAIO HOMOGÊNEO DE HIBRIDIZAÇÃO DUPLEX OU TRIPLEX POR MEIO DE MÚLTIPLAS MEDIÇÕES SOB CONDIÇÕES VARIADAS

Classificação IPC

Prioridades unionistas

Resumo técnico

"ENSAIO HOMOGÊNEO DE HIBRIDIZAÇÃO DUPLEX OU TRIPLEX POR MEIO DE MÚLTIPLAS MEDIÇÕES SOB CONDIÇÕES VARIADAS". A invenção apresenta métodos de ensaio homogêneos para hibridização de ácidos nucleicos, detecção e avaliação. O ensaio inclui obter sinais a partir de uma amostra de teste ambos antes como durante a aplicação de voltage à amostra de teste e correlacionar os sinais, cada um dos quais é indicativo da afinidade de ligação da sonda e do alvo de cada um. O ensaio permite determinar uma extensão de correspondência entre a sonda e o alvo, a medida que a voltage pode ser calibrada de maneira a desestabilizar de forma significativa qualquer hibridização, exceto hibridização perfeitamente complementar. Os sinais cuja magnitude está correlacionada com a afinidade de ligação pode ser condutância elétrica e/ou intensidade de fluorescência. Preferivelmente, ambos os pares de sinais são medidos e comparados de maneira a aumentar a confiabilidade do ensaio. O ensaio pode detectar hibridização específica entre sondas de fita única e alvos de fita dupla não desnaturados para formar triplexes, evitando assim a necessidade de desnaturar os alvos. Os métodos de ensaio podem também ser aplicados a complexos de hibridização duplex.