NOVOS ENSAIOS DE LIGANTE

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Resumo técnico

NOVOS ENSAIOS DE LIGANTE. A presente invenção está envolvida com a detecção de ligantes que se ligam aos receptores de hormônio esteroide e os ativam. Especificamente, a presente invenção provê kits de teste e métodos de ensaio para a identificação seletiva de ligantes do receptor de hormônio esteroide a partir de uma amostra de teste. Importantemente, os kits de teste e métodos de ensaio aqui descritos são livres de célula, e não requerem a fabricação de extratos nucleares caros para o seu desempenho. Ao invés, os kits de teste e métodos de ensaio aqui descritos utilizam polimerases de polipetídeo único, tais como T7 RNA polimerase, ligada a um construto repórter. A atividade da enzima é inibida, ao invés de ativada, pelos complexos de receptor de hormônio esteroide ligados a ligante que apenas se formam na presença de um ligante alvo. Consequentemente, uma mudança medida em uma propriedade física do construto repórter (por exemplo produção de fluorescência) pode ser usada para determinar a presença de um ligante alvo em uma amostra sob investigação.