PROCESSO DE OBTENÇÃO DE INTERFERON ALFA-2A HUMANO RECOMBINANTE DE FORMA SOLÚVEL EM ESCHERICHIA COLI, PURIFICADO E CARACTERIZADO, E RESPECTIVO INSUMO FARMACÊUTICO ATIVO RESULTANTE

IPC Classification

Abstract

PROCESSO DE OBTENÇÃO DE INTERFERON ALFA-2A HUMANO RECOMBINANTE DE FORMA SOLÚVEL EM ESCHERICHIA COLI, PURIFICADO E CARACTERIZADO, E RESPECTIVO INSUMO FARMACÊUTICO ATIVO RESULTANTE. A presente invenção se refere a um bioprocesso econômico e inovador envolvendo a obtenção da proteína recombinante interferon-alfa2a humano (rhIFNa2a) de forma solúvel em sistema procarioto. Foi empregada a cepa BL21(DE3) de Escherichia coli, transformada com plasmídeo do tipo pET9a contendo o gene de interesse, sem sequências para tags de solubilidade nem de bioafinidade ou proteínas acessórias. A invenção se insere na área da biotecnologia e também é caracterizada pelo cultivo em meio sem indutores, sob temperatura amena, direcionando a expressão constitutiva (basal) da proteína-alvo de forma solúvel e funcional no citoplasma bacteriano. A estratégia de purificação foi composta por clarificação, precipitação isoelétrica e uma única etapa cromatográfica de troca catiônica. O insumo farmacêutico ativo obtido foi caracterizado quanto à sua identidade, pureza, teor e atividade biológica in vitro, podendo ser usado na formulação de biofármaco para o combate ao câncer e infecções virais.