SISTEMA DE DUAS FASES AQUOSAS ACOPLADO À CROMATOGRAFIA PARA OBTENÇÃO DE ENZIMAS

Classificação IPC

Resumo técnico

SISTEMA DE DUAS FASES AQUOSAS ACOPLADO À CROMATOGRAFIA PARAOBTENÇÃO DE ENZIMAS. A invenção refere-se ao acoplamento de um sistema de duas fases aquosas (SDFA) a uma cromatografia para purificação de enzimas, preferencialmente afrutosiltransferase (FTase), nesse caso, produzida por fungo filamentoso. Para SDFAutiliza-se preferencialmente polietileno glicol e citrato de sódio (PEG/citrato de sódio).As etapas foram acopladas utilizando colunas verticalmente posicionadas em superiore inferior, onde a coluna superior compreende ao SDFA a inferior à resina cromatográfica, e ambas conectadas por mangueira ou tubo, onde o fluxo é controlado por válvula presente na coluna superior. Apesar da implantação de diversas técnicas para o aumento da eficiência na purificação enzimática industrial, muitas dessas técnicas são demoradas, com muitas etapas e acabam resultando num menor rendimento. Assim, o acoplamento do SDFA a uma cromatografia possibilitou a redução do tempo gasto na purificação de enzimas, de forma que o SDFA foi utilizado nas etapas de extração, clarificação e concentração e a cromatografia como etapa final da purificação. Dentre as possíveis enzimas para purificação nesse modelo, a FTase apresentou 12,39 U/mL de atividade, fator de purificação 6,42 e um rendimento em atividade de 352%. Assim, os resultados sugerem que a técnica é eficaz na purificação de enzimas, podendo ser aplicada em diversos setores industriais como alimentos,farmacêutico e animal.