VETOR DE EXPRESSÃO, CÉLULA HOSPEDEIRA CULTIVADA E PROCESSO PARA PRODUZIR POLIPEPTÍDEO DE INTERFERON DE CONSENSO DO LEUCÓCITO HUMANO

IPC Classification

Priority claims

Abstract

Patente de Invenção "Método para a fabricação de seqüências DNA lineares, seqüência de DNA fabricada, produto polipepetídico, vetor de transformação de DNA, gene fabricado, vetor de transformação de microorganismo, processo para produção de interferon, processo para a produção de um análogo polipeptídico do interferon da imunidade humana, interferon, processo para a produção de um polipeptídico, material reagente, produto proteináceo, produto polipeptídico, e, processo para aumentar a expressão de um gene exógeno". São descritos procedimentos rápidos e altamente eficientes para a síntese total de seqüências lineares de DNA, de dupla fita, com um comprimento superior a 200 pares de bases, seqüências estas que podem compreender genes estruturais inteiros. Seqüências nóveis são preparadas a partir de duas ou mais subunidades de DNA providas de regiões terminais que compreendem sítios de corte por endonuclease de restrição que facilitam a inserção de subunidades em um vetor selecionado para fins de amplificação durante o curso do processo global de montagem. As seqüências totais, após a montagem final, incluem pelo menos um, e preferivelmente mais sítio(s) singular(es) de corte por endonuclease de restrição em posições intermediárias ao longo da seqüência, permitindo fácil excisão e substituição de subunidades e a preparação correspondentemente fácil de múltiplos análogos estruturais de polipeptídeos codificados pelas seqüências. Genes fabricados incluem preferivelmente códons selecionados de entre códons alternativos que especificam o mesmo aminoácido na base da expressão preferencial em um microorganismo hospedeiro projetado (e.g., E.coli ) a ser transformado. É ilustrada a preparação e expressão de genes fabricados capazes de dirigir a síntese de interferons da imunidade humana e dos leucócitos humanos e de outros produtos proteináceos biologicamente ativos que diferem das formas que ocorrem naturalmente em termos da identidade e/ou posição relativa de um ou mais animoácidos, e em termos de uma ou mais características biológicas ou farmacológicas, mas que conservam substancialmente outras tais características.