CLONE DE HPIV RECOMBINANTE, PROCESSOS PARA PREPARAR VÍRUS PARAINFLUENZA HUMANO RECOMBINANTE E PARA INTRODUZIR UMA MUTAÇÃO ESPECÍFICA DE SÍTIO DENTRO DO GENOMA DE UM VÍRUS PARAINFLUENZA HUMANO, E, CÉLULA HOSPEDEIRA

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''CLONE DE HPIV RECOMBINANTE, PROCESSOS PARA PREPARAR VÍRUS PARAINFLUENZA HUMANO RECOMBINANTE E PARA INTRODUZIR UMA MUTAÇÃO ESPECÍFICA DE SÍTIO DENTRO DO GENOMA DE UM VÍRUS PARAINFLUENZA HUMANO, E, CÉLULA HOSPEDEIRA''. É fornecido um sistema para gerar vírus parainfluenza humano recombinante, particularmente vírus parainfluenza humano, recombinante, infeccioso, tipo 3 (HPIV-3). Em uma versão, o sistema compreende um clone compreendendo uma seqüência de nucleotídeo que codifica um anti-genoma de comprimento total, de sentido positivo, do HPIV e pelo menos um clone de suporte compreendendo uma seqüência de nucleotídeo que codifica a proteína P do HPIV e a proteína L do HPIV. Em outra versão, o sistema compreende ainda um clone de suporte, que compreende uma seqüência de nucleotídeo que codifica a proteína NP do HPIV. A presente invenção também fornece um clone que compreende uma seqüência de nucleotídeo codificando o antigenoma de comprimento total, de sentido positivo do HPIV-3. O clone também compreende um promotor de polimerase do RNA, operativamente ligado à seqüência de codificação do antigenoma do HPIV-3. Em uma versão preferida, o clone compreende também um promotor da polimerase do RNA, operativamente ligado à seqüência codificadora do antigenoma do HPIV-3. Em uma versão preferida, o clone compreende ainda uma seqüência de nucleotídeo que codifica uma ribozima imediatamente a jusante da seqüência codificando o anti-genoma do HPIV-3. A presente invenção também refere-se a um processo de preparar vírus HPIV-3 recombinante, tendo mutações específicas de sítio no genoma HPIV-3. O processo compreende preparar um clone compreendendo uma seqüência codificando o antigenoma do HPIV-3 modificado; introduzir o clone do HPIV-3 modificado e suportar clones que compreendem seqüências de nucleotídeo codificando uma proteína P de HPIV-3, uma proteína L do HPIV-3 e, preferivelmente, uma proteína NP do HPIV-3 dentro das células hospedeiras; e cultivar as células hospedeiras sob condições que permitam a síntese do antigenoma do HPIV-3 modificado e das proteínas L, P e NP do HPIV-3.