PROCESSOS PARA A CONSTRUÇÃO DE UMA BIBLIOTECA DE POLINUCLEOTIDEOS HOMÓLOGOS RECOMBINADOS, PARA A IDENTIFICAÇÃO UM POLIPEPTÍDEO DE INTERESSE, E, PARA A PRODUÇÃO DE UM POLIPEPTÍDEO DE INTERESSE.

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Abstract

"PROCESSOS PARA A CONSTRUÇÃO DE UMA BIBLIOTECA DE POLINUCLEOTÍDEOS, HOMÓLOGOS RECOMBINADOS, PARA A IDENTIFICAÇÃO UM POLIPEPTÍDEO DE INTERESSE, E, PARA A PRODUÇÃO DE UM POLIPEPTÍDEO DE INTERESSE". Processo para a construção in vitro de uma biblioteca de polinucleotídeos homólogos recombinados a partir de um número de diferentes gabaritos de DNA de partida e iniciadores por deslocamentos de gabarito induzidos durante uma síntese de polinucleotídeos é descrito, assim: A. iniciadores estendidos são sintetizados por a) desnaturação de gabaritos de DNA, b) recombinação dos iniciadores para os gabaritos, c) extensão dos referidos iniciadores pelo uso de uma polimerase, d) parada da síntese, e e) separar os iniciadores estendidos dos gabaritos; B. um deslocamento de gabarito é induzido por a) isolamento dos iniciadores estendidos a partir dos gabaritos e repetindo as etapas A. b) a A.e) usando os iniciadores estendidos como tanto iniciadores com gabaritos, ou b) repetindo as etapas A.b) e A.e), C. este processo é terminado após um número apropriado de ciclos de etapas de processo A e B.a), A. e B.b), ou combinações dos mesmos. Opcionalmente, os polinucleotídeos são amplificados em uma reação PCR padrão com iniciadores específicos para seletivamente amplificar polinucleotídeos homólogos de interesse.