PROCESSO PARA PRODUÇÃO DO INTERFERON BETA RECOMBINANTE DE MEMBRANA AMNIÓTICA HUMANA E DA PROTEÍNA DO INTERFERON BETA RECOMBINANTE DE MEMBRANA AMNIÓTICA HUMANA.

IPC Classification

Abstract

Patente de invenção para o "PROCESSO PARA PRODUÇÃO DA PROTEÍNA DO INTERFERON BETA DE MEMBRANA AMINIÓTICA HUMANA RECOMBINANTE E DA PROTEÍNA DO INTERFERON BETA- DE MEMBRANA AMNIÓTICA HUMANA RECOMBINANTE" . A presente invenção diz respeito a proteína de interferon beta de membrana aminiótica humana recombinante produzida através de técnicas de engenharia genética, para ser empregada em uso clínico humano ou veterinário ou ainda em pesquisa. O DNA contendo o gene que codifica a proteína interferon beta humano foi obtido realizando as seguintes etapas: (1) Cultivo primário de células amnióticas humanas, (2) Infecção com o vírus Sendai, (3) Obtenção de mRNA, (4) Lise das células, (5) Fracionamento de RNA, (6) Dissolução de RNA, (7) Extração de RNA, (8) Precipitação de RNA, (9) Sintese de primeira fita de cDNA, (10) Amplificação do DNA, (11) Fracionamento do DNA, (12) Purificação do DNA, (13) Digestão do DNA, (14) Clonagem, (15) Ligação do DNA ao vetor, (16) Transformação das bactérias competentes, (17) Seleção dos clones positivos, (18) Produção da proteína, (19) Indução da bactéria, (20) Lise da bactéria, (21) Purificação da proteína. Sendo que a proteína de interferon beta humano recombinante apresenta na sua estrutura a seguinte sequência de aminoácidos: MSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLKDRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLANVYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIVRVEILRNFYFINRLTGYLRN