PROCESSO DE ISOLAMENTO DE DNA

IPC Classification

Priority claims

Abstract

A presente invenção proporciona um rápido e eficiente processo de isolamento, armazenamento e clivagem de DNA que fornece DNA adequado para amplificação através de um processo seqúencial específico. O processo para isolamento de DNA biologicamente ativo a partir de uma amostra biológica com estruturas contendo DNA inclui: (1) contactar uma amostra biológica possuindo estruturas que contêm DNA com uma lise e tampão de armazenamento que compreendem um sal caotrópico não-anfipático suficiente para quebrar estruturas contendo DNA na amostra, e um agente quelante para preservar de degradação o DNA, para formar uma mistura da amostra biológica, da lise e do tampão de armazenamento; (2) incubar a mistura formada na etapa (1) com uma nuclease química contendo metal, a qual cliva o DNA a fragmentos de DNA; e (3) purificar os fragmentos de DNA. O DNA isolado pode ser DNA circular fechado em cadeia, tal como DNA de cinetoplasto de Trypanosoma cruzi. Os fragmentos de DNA purificados podem ser usados para amplificação num sistema de amplificação de DNA baseado em seqúência, o qual emprega iniciadores que hibridizam com o DNA a fim de determinar a presença de uma seqúência específica de DNA nos fragmentos. A combinação dos processos de isolamento e amplificação podem ser úteis na detecção de doenças parasíticas, bacterianas e virais, mediante identificação de seqúências de DNA associadas aos organismos que as causam.