NOVOS MARCADORES SELECIONAVEIS RIGOROSOS

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Abstract

NOVOS MARCADORES SELECIONÃVEIS RIGOROSOSA presente invenção refere-se a construtos de ácido nucléico compreendendo genes marcadores selecionáveis em uma unidade de transcrição multicistrônica para uso na geração e seleção de células hospedeiras eucarióticas para a expressão de um produto do gene de interesse. Para um maior rigor de seleção, a sequência de codificação de um marcador selecionável pode ser diretamente precedida por um quadro de leitura aberta funcional relativamente curto, para reduzir a eficiência da tradução do marcador selecionável e/ou a sequência de aminoácidos do marcador selecionável pode compreender uma ou mais mutações que reduzem o nível de resistência fornecido pelo marcador mutante em comparação ao seu homólogo do tipo selvagem. A invenção refere-se adicionalmente a métodos para gerar células hospedeiras eucarióticas para a expressão de um produto do gene de interesse, em que esses construtos de ácido nucléico são usados, e os métodos para produzir um produto de gene de interesse em que, desse modo, as células hospedeiras geradas são aplicadas.