Composição secada para PCR de partida quente com estabilidade de longa duração, método de preparação da mesma, kit para PCR de partida quente e método para ampliar o ácido nucleico

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Abstract

COMPOSIÃÃO SECADA PARA PCR DE PARTIDA QUENTE COM ESTABILIDADE DE LONGA DURAÃÃO, MÃTODO DE PREPARAÃÃO DA MESMA, KIT PARA PCR DE PARTIDA QUENTE E MÃTODO PARA AMPLIAR O ÃCIDO NUCLÃICO.A presente invenção refere-se a uma composição secada para a PCR de partida quente, mais precisamente a uma composição secada para a PCR de partida quente com estabilidade aperfeiçoada e capacidade de armazenagem de longa duração, a qual é caracteristicamente preparada pelas etapas de preparar uma mistura de reação por mistura de uma solução aquosa contendo tampão de reação, MgCl,, 4 tipos de dNTPs, DNApolimerase com pirofosfato e pirofosfatase, em um tubo de reação; e secar a mistura de reação preparada acima, a um método de preparação da mesma e a um método para ampliar o ácido nucléico usando a mesma. A composição secada para a PCR de partida quente é adicionada com o pirofosfato e a pirofosfatase juntos, antes da secagem, de modo queela pode ter estabilidade aperfeiçoada e capacidade de armazenagem de longa duração, bem como conveniência no uso, em comparação com as composições convencionais para a PCR de partida quente. Portanto, esta composição pode ser efetivamente usada para a PCRde partida quente, a PCR multiplex ou a PCR em tempo real quantitativa.