PROCESSO DE FERMENTAÇÃO DE DENSIDADE DE CÉLULA BAIXA PARA A PRODUÇÃO DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES HETERÓLOGAS EM MICROORGANISMOS

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Abstract

PROCESSO DE FERMENTAÇÃO DE DENSIDADE DE CÉLULA BAIXA PARA A PRODUÇÃO DE PROTEÍNAS RECOMBINANTES HETERÓLOGAS EM MICROORGANISMOS Um processo de fermentação de densidade de célula baixa para a produção de proteínas heterológas em microorganismos. A cultura celular obtida por cultivo de microorganismos hospedeiros transformados com um vetor que transporta o material genético para as referidas proteínas e um promotor induzível sob condições de fermentação em batelada é alimentada com um meio de alimentação depois que uma OD~ 600~ de 0,16 a 8 foi alcançada ou depois de 0 a 4 hrs do início do processo de fermentação. O meio de alimentação compreende 5 a 30% da fonte de carbono e 1 a 30% da fonte de nitrogênio e o mg a 400 mg de antibióticos e 2,5 a 4,25% de fosfatos inorgânicos e elementos de traço. A concentração da fonte de carbono no meio de alimentação é 10 a 30 e o teor de aminoácido na fonte de nitrogênio é 45 a 95%. A taxa de alimentação inicial está na faixa de 0 ml/hr a 12 ml/hr e é exponentialmente aumentada por um exponente na faixa de 0,1 a 0,4 e/ou linearmente com o declive da curva na faixa de 0,5 a 3. A produção das proteínas heterólogas é induzida com 0,01 - 4% de indutor em uma densidade de célula de OD~ 600~ 0,1 - OD~ 600~ 50. A alimentação da cultura celular com o meio de alimentação e a taxa de alimentação descrita acima é continuada depois que a produção foi induzida. O PO~ 2~ é ajustado entre 10% a 60% passando-se ar estéril no caldo de fermentação e a temperatura e pH do caldo de fermentação são mantidos a 33,198>C - 41 C e 6,9 - 8,5, respectivamente durante a termentação completa.