MÉTODO DE ARMAZENAMENTO DE CÉLULAS ENDOTELIAIS CORNEANAS HUMANAS E/OU CÉLULAS ENDOTELIAIS CORNEANAS HUMANAS PRECURSORAS

IPC Classification

Priority claims

Abstract

MÉTODO DE ARMAZENAMENTO DE CÉLULAS ENDOTELIAIS CORNEANAS HUMANAS E/OU CÉLULAS ENDOTELIAIS CORNEANAS HUMANAS PRECURSORAS. A presente invenção aborda o problema de preservação de células endoteliais corneanas humanas e/ou células endoteliais corneanas humanas progenitoras, manter uma alta taxa de sobrevivência e, em cultura após a preservação, minimizar a taxa de ocorrência de células contaminantes. O método de preservação aqui descrito compreende: coletar células endoteliais corneanas humanas e/ou células endoteliais corneanas humanas progenitoras, ditas células tendo sido proliferadas em um meio de cultura contendo um inibidor ROCK e em que o teor do fator de crescimento epidérmico (EGF) é menor do que a concentração que causa uma transformação, no momento em que um ou mais dos requisitos a seguir são satisfeitos; e preservação das células em um estado suspenso: (a) O período de tempo imediatamente após uma mudança morfológica nas células de um formato fusiforme para um formato poligonal com uma proporção de diâmetro longo/curto próxima de 1 ou um formato circular até imediatamente antes do momento no qual os limites entre as células se tornam indistintos, (b) O período desde o momento no qual o nível de expressão de CD44 é metade ou menor do que o valor máximo após a última subcultura até o momento no qual o nível de expressão de CD44 atinge um platô, (c) O momento no qual a densidade celular é de 900 células/mm2 a 2500 células/mm2 inclusive, (d) Entre 4-14 dias de cultura, inclusive, após a última subcultura.