MÉTODO, COMPOSIÇÃO E KIT PARA PCR QUANTITATIVA FLUORESCENTE E USO DOS MESMOS

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Abstract

MÉTODO, COMPOSIÇÃO E KIT PARA PCR QUANTITATIVA FLUORESCENTE E USO DOS MESMOS. A presente invenção refere-se ao campo de detecção de biologia molecular, mais particularmente, a um método para PCR quantitativa fluorescente. O método inclui: 1) misturar um par iniciador a montante e a jusante, uma sonda fluorescente, e um reagente de amplificação de PCR; e 2) realizar a PCR quantitativa fluorescente, em que a sonda fluorescente tem dois grupos de arrefecimento brusco, nos quais um primeiro grupo de arrefecimento brusco é localizado em uma terminação 3' e um segundo grupo de arrefecimento brusco é identificado em uma base T e é 10-15 nt afastado do primeiro grupo de arrefecimento brusco. Com uso do método para PCR quantitativa fluorescente, sinais de fundo na PCR quantitativa fluorescente podem ser reduzidos; além disso, a sensibilidade de PCR pode ser aprimorada, a ocorrência de falsos negativos em detecção pode ser reduzida, e a eficiência de amplificação da PCR quantitativa fluorescente também pode ser aprimorada.