SELEÇÃO POR KNOCK-IN DE GENE ESSENCIAL

IPC Classification

Priority claims

Abstract

SELEÇÃO POR KNOCK-IN DE GENE ESSENCIA. A presente invenção refere-se a estratégias, sistemas, composições e métodos para produção eficiente de clones celulares knock-in sem genes repórteres. Um gene essencial é alvejado com o uso de um cassete knock-in que compreende uma sequência de codificação exógena para um produto gênico de interesse (ou "sequência de carga") no quadro com e a jusante (3') de uma sequência de codificação exógena ou sequência de codificação parcial do gene essencial. Even-tos de alvejamento indesejados criam uma versão não funcional do gene essencial, em essência um knock-out, que é "resgatado" pela integração correta do cassete knock-in, que restaura a região codificadora do gene essencial para que um produto gênico funcional seja produzido e posiciona a sequência de carga no quadro com e a jusante da sequência de codificação do gene essencial.