MÉTODOS PARA MODIFICAR UM ÁCIDO NUCLEICO ALVO, COMPLEXO, E CASSETES DE EXPRESSÃO OTIMIZADOS EM CÓDON PARA EXPRESSÃO EM UM ORGANISMO E EM UMA PLANTA

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Abstract

COMPOSIÇÕES E MÉTODOS PARA SUBSTITUIÇÃO DO DNA CODIFICADO PELO RNA DOS ALELOS.A presente invenção refere-se a construtos de ácido nucleico recombinantes compreendendo proteínas efetoras CRISPR-Cas do tipo V, transcriptases reversas e ácidos nucleicos guia estendidos e métodos de uso dos mesmos para modificar ácidos nucleicos em plantas. Em um primeiro aspecto, um método de modificação do ácido nucleico alvo é provido, o método compreendo: colocar um ácido nucleico alvo em contato com (a) uma proteína efetora CRISPR-Cas do Tipo V ou uma proteína efetora CRISPR-Cas do Tipo II; (b) uma transcriptase reversa, e (c) um ácido nucleico guia estendido (por exemplo, RNA CRISPR estendido do Tipo II ou do Tipo V, DNA CRISPR estendido do Tipo II ou do Tipo V, crRNA estendido do Tipo II ou do Tipo V, crDNA) estendido do Tipo II ou Tipo V, desse modo modificando o ácido nucleico alvo.