PULULANASE VARIANTE, VARIANTE, POLINUCLEOTÍDEO, CONSTRUTO DE ÁCIDO NUCLEICO OU VETOR DE EXPRESSÃO, CÉLULA HOSPEDEIRA RECOMBINANTE, COMPOSIÇÃO, MÉTODOS DE PRODUÇÃO DE UMA PULULANASE VARIANTE E DE PRODUÇÃO DE UM MOSTO DE CERVEJA, PROCESSOS DE PRODUÇÃO DE UM XAROPE E DE PRODUÇÃO DE PRODUTOS DE FERMENTAÇÃO, E, USO DA CÉLULA HOSPEDEIRA E DA PULULANASE VARIANTE

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Abstract

PULULANASE VARIANTE, VARIANTE, POLINUCLEOTÍDEO, CONSTRUTO DE ÁCIDO NUCLEICO OU VETOR DE EXPRESSÃO, CÉLULA HOSPEDEIRA RECOMBINANTE, COMPOSIÇÃO, MÉTODOS DE PRODUÇÃO DE UMA PULULANASE VARIANTE E DE PRODUÇÃO DE UM MOSTO DE CERVEJA, PROCESSOS DE PRODUÇÃO DE UM XAROPE E DE PRODUÇÃO DE PRODUTOS DE FERMENTAÇÃO, E, USO DA CÉLULA HOSPEDEIRA E DA PULULANASE VARIANTE. A presente invenção se refere a uma pululanase variante, com maior estabilidade térmica e/ou maior atividade térmica em comparação com uma pululanase de origem, compreendendo uma substituição em pelo menos uma posição selecionada de uma posição correspondente às posições 432, 486, 370, 17, 77, 103, 106, 107, 190, 196, 197, 262, 279, 283, 321, 367, 375, 382, 399, 401, 402, 411, 412, 434, 435, 443, 446, 459, 460, 479, 490, 498, 514, 529, 531, 533, 541, 545, 581, 583, 595, 649, 665, 688, 700, 709, 804, 811 da SEQ ID NO: 1 e, opcionalmente, uma deleção de um ou mais, por exemplo, todos os aminoácidos nas posições 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827 e 828, em que a variante tem atividade de pululanase e em que a variante tem pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95%, pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98% ou pelo menos 99%, porém menos de 100% de identidade de sequência com uma alfa-amilase de origem selecionada do grupo que consiste nas SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 5. Outro aspecto da presente invenção se refere a um processo para a liquefação de material contendo amido a uma temperatura acima da temperatura de gelatinização inicial usando uma alfa-amilase e uma pululanase termoestável da invenção.