MÉTODO E KIT PARA PRODUZIR UMA MOLÉCULA DE RNA DE FITA SIMPLES, E, MOLÉCULA DE OLIGORNA DE FITA SIMPLES.

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Abstract

A presente invenção provê um método para produzir uma molécula de RNA de fita simples em forma de grampo que inibe a expressão de um gene alvo. O método inclui (i) uma etapa de anelamento para anelar uma primeira molécula de oligoRNA de fita simples com uma segunda molécula de oligoRNA de fita simples e (ii) uma etapa de ligação para ligar, com o uso de uma ligase na família Rnl2, a extremidade 3? da primeira molécula de oligoRNA de fita simples à extremidade 5? da segunda molécula de oligoRNA de fita simples. A sequência produzida por meio da ligação da primeira molécula de oligoRNA de fita simples à segunda molécula de oligoRNA de fita simples contém uma sequência de inibição de expressão de gene dirigida ao gene alvo.