MÉTODOS E KITS PARA DETECÇÃO DE MOLÉCULAS DE ÁCIDO NUCLEICO

IPC Classification

Priority claims

Abstract

Trata-se de um método para a detecção de um ou mais produtos de amplificação de polinucleotídeos, sendo que o método compreende, em uma modalidade, as etapas de: a) fornecer um ou mais grupos iniciadores de oligonucleotídeo, sendo que cada grupo compreende: i) um iniciador direto compreendendo uma porção específica de cassete de fluorescência e uma porção específica de alvo 3' a jusante; e ii) um ou mais iniciadores-alvo específicos; b) fornecer um ou mais pares extintos fluorescentes, sendo que cada par é caracterizado por: i) um primeiro oligonucleotídeo de cassete marcado com uma porção química fluorescente e que tem uma sequência que é capaz de hibridar com o complemento da porção específica de cassete de fluorescência do iniciador direto de um determinado grupo iniciador de oligonucleotídeo; e ii) um segundo oligonucleotídeo de cassete marcado com uma porção química de extinção; c) iniciar uma reação de amplificação isotérmica de polinucleotídeo na presença de uma polimerase de DNA de deslocamento de fita, gerando uma sequência complementar a pelo menos uma porção do iniciador direto relevante, de modo que o segundo oligonucleotídeo de cassete relevante seja menos capaz de hibridar com o primeiro assete de oligonucleotídeo relevante, pelo qual um sinal é gerado; e d) detectar o sinal.