MÉTODO PARA REPLICAÇÃO OU AMPLIFICAÇÃO DE DNA CIRCULAR

IPC Classification

Priority claims

Abstract

A presente invenção refere-se a um método que possibilita a replicação ou amplificação de DNA circular, particularmente DNA circular de cadeia longa, em um sistema livre de célula. Especificamente, é provido um método para inibir a geração de um multímero de DNA, que é um subproduto, durante a replicação ou amplificação de DNA circular tendo uma sequência de iniciação de replicação (origem de cromossomo (oriC)) utilizando as seguintes enzimas:(1) primeiro, as enzimas que catalisam a replicação de DNA circular;(2) segundo, as enzimas que catalisam uma reação de ligação de fragmentos de Okazaki, para sintetizar moléculas de dois DNAs circulares irmãos formando um catenano; e(3) terceiro, as enzimas que catalisam uma reação de separação das moléculas de dois DNAs circulares irmãos. Além disso, é provido um método que compreende a introdução de oriC no DNA circular utilizando um transposon.