MÉTODO PARA PRODUZIR UM PRODUTO DE CONJUGAÇÃO ENZIMÁTICA DE TRÊS POLIPEPTÍDEOS

IPC Classification

Priority claims

Abstract

No presente pedido é relatado um método para produzir um produto de conjugação enzimática de três polipeptídeos que compreende a incubação simultânea de i) um primeiro polipeptídeo que compreende a sequência de aminoácidos de LPXTG (SEQ ID NO: 20, em que X pode ser qualquer resíduo de aminoácido), um segundo polipeptídeo que compreende a sequência de aminoácidos de LPXTA (SEQ ID NO: 31, em que X pode ser qualquer resíduo de aminoácido), um terceiro polipeptídeo que tem duas terminações N de modo que o polipeptídeo tem uma sequência de aminoácidos de oligo-glicina Gm (m = 2 (SEQ ID NO: 22) ou 3 (SEQ ID NO: 23) ou 4 (SEQ ID NO: 24) ou 5 (SEQ ID NO: 25)) em sua primeira terminação N e uma sequência de aminoácidos de oligo-alanina Am (m = 2 (SEQ ID NO: 26) ou 3 (SEQ ID NO: 27) ou 4 (SEQ ID NO: 28) ou 5 (SEQ ID NO: 29) em sua segunda terminação N, um quarto polipeptídeo com atividade de sortase de modo que o polipeptídeo é derivado de sortase A de Staphylococcus aureus, e um quinto polipeptídeo com atividade de sortase de modo que o polipeptídeo é derivado de sortase A de Streptococcus pyogenes e a recuperação do conjugado a partir da mistura de reação.